嘔吐毒素的危害和限量標準及快速定量檢測方法嘔吐毒素主要成分為DON(deoxynivalenol),是一種單端孢霉烯族的化合物,主要是來自于鐮刀菌屬,包括為禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌。
嘔吐毒素DON對于糧食谷物類的污染狀況與產生毒素的菌株、溫度、濕度、通風、日照等因素有關。主要污染物有小麥、大麥、燕麥、玉米等谷類作物;面包、餅干、麥制點心等糧食制品;動物的奶、蛋中等。小麥赤霉病主要分布在潮濕溫帶地區,我國大部分地區又處于這一地帶,所以造成嘔吐毒素DON污染較嚴重,而在多雨年份地區污染狀況則更為嚴重,這給飼料企業以及養殖業主帶來了很大的損失,人們食用含有嘔吐毒素的食物會危害到人體健康。
一、嘔吐毒素的理化特性:
嘔吐毒素(DON),又被稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,化學名為3α, 7α, 15一三羥基草鐮孢菌-9-烯-8-酮,是一種單端孢霉烯的族化合物。而單端孢霉烯族毒素一共有150多種,嘔吐毒素(DON)是單端孢霉烯族毒素中最重要的一種毒素。
嘔吐毒素DON純品是一種白色針狀結晶,其結構環為四環的倍半萜,分子量為296.3,熔點為151 ~153℃(醋酸乙基石油),嘔吐毒素DON易溶于極性的溶劑:如水、甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯、丙酮等,不溶于正已烷、丁醇、石油醚等。
嘔吐毒素DON耐熱,一般不會在加工、儲存以及烹調過程中被破壞;耐藏力強,病麥經四年貯藏,其中的嘔吐毒素DON仍能保留其原有的毒性,這使得在實驗室條件下可長期貯存保持毒力不變的樣本;在弱酸中部不分解,但在加堿或高壓處理下,可破壞部分含有嘔吐毒素的谷物類加工產品;在甲醇中不穩定,22天后可被轉化為其它產物。
二、嘔吐毒素對動物和人的危害:
細胞毒性:(1)通過對磷脂雙層的滲透作用,作用于亞細胞水平層面;(2)通過細胞膜之間的相互作用;(3)通過自由基介導脂質的過氧化作用。
免疫毒性:(1)可以形成對病原體免疫應答的抑制;(2)可以造成自身免疫反應的誘發。
三致作用:可能具有致癌、致畸、致突變作用,是一種潛在的隱形的致癌物質。
2.1 嘔吐毒素對動物的危害
單端孢霉烯族毒素都有可能引起鴨、貓、狗、豬、鴿子等不同動物的嘔吐癥狀,動物毒力學的一項試驗研究表明:不同畜種的動物對嘔吐毒素DON的敏感程度按順序是:豬>小鼠>大鼠>家禽和反芻動物。
對嘔吐毒素最為敏感的動物是豬,尤其敏感的是斷奶仔豬,豬對嘔吐毒素DON的敏感程度約為其他動物的100-200倍。飼料中0.3~0.5mg/kg的毒素就會引起豬拒食、生長能力下降以及對傳染病的抵抗能力下降,飼料中含1mg/kg以上的嘔吐毒素就可能引起豬拒食、嗜睡、生長嚴重受阻、體增重減慢、免疫機能減退、喪失肌肉協調性以及嘔吐等癥狀。對生長較為肥育的豬而言,含有14mg/kg嘔吐毒素的飼料飼喂后10~20min即會出現嘔吐、不正常的焦慮和磨牙現象,嘔吐現象僅發生在第1天。而且嘔吐毒素含量在0~14mg/kg的試驗中,飼糧中每增加1mg/kg嘔吐毒素,生長肥育豬的采食量減少6%,在含毒量10mg/kg以上即完全拒食。奶牛的健康狀況、產奶量、攝食量幾乎不受影響,牛奶中也檢測不到嘔吐毒素DON及其脫氧產物。
嘔吐毒素的急性毒性與動物的種屬、年齡、性別、染毒途徑有關,雄性動物對毒素比較敏感。急性中毒的動物主要表現為站立不穩、反應遲鈍、豎毛、食欲下降、嘔吐等,還可引起動物的拒食反應,低劑量攝入會造成食欲下降、生長緩慢、發育不良和病死率升高等現象;大量或長期攝入會發生急性中毒、嘔吐、直腸出血和腹瀉,與腸道炎癥極其相似。嘔吐毒素對動物機體毒性主要分為免疫毒性和細胞毒性。在很多物種上已經得到證實,嘔吐毒素DON可以通過胎盤轉移到胎兒。懷孕母豬感染嘔吐毒素DON后在胎兒的血漿、肝和腎中均檢測到嘔吐毒素DON。
2.2 嘔吐毒素對人類健康的危害
人類食用含有嘔吐毒素的糧油食品后,會出現胃部不適、眩暈、腹脹、頭痛、惡心、嘔吐,手足發麻、全身乏力、顏面潮紅、以及食物中毒性白細胞缺乏癥等癥狀。癥狀較為嚴重者可見呼吸、脈搏、體溫、血壓波動,四肢發軟、步態不穩,更為嚴重時損害造血系統造成死亡。
嘔吐毒素主要通過胃腸道吸收,經血液循環進入肝臟代謝后經腎臟隨尿液排出,容易造成對各個器官的普遍損傷。而且嘔吐毒素在人體中的半衰期約為2~4h,代謝迅速,8h后就可能檢測不到嘔吐毒素和它的代謝物。
三、中國及主要國家對嘔吐毒素的限量標準
3.1、中國嘔吐毒素限量標準 (飼料)
3.2歐盟嘔吐毒素限量標準(飼料)
3.3美國嘔吐毒素限量標準(飼料)
四、嘔吐毒素常用檢測方法
1、膠體金定性卡法:
是嘔吐毒素最簡便的檢測方法,檢測不需要配套儀器,樣品處理簡單,五到十分鐘就可以看到檢測結果??梢愿鶕礼、T線,初步確定所測樣本毒素含量范圍,但不能給出具體數值。價格最低、沒有國標支持,適合企業初檢使用。
2、酶聯免疫吸附測定法:
依據該方法開發出來的嘔吐毒素檢測試劑盒,可以半定量的檢測樣品中嘔吐毒素的含量,目前國產試劑盒大量上市,價格適中,有國標支持,適合中小型企業質量控制,或者作為產品初步質量控制。
3、免疫親和柱為分離手段:用高效液相色譜儀作為檢測工具的分析方法。該項技術靈敏度高,測定范圍廣泛,采用單克隆免疫技術,可以特效性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高,正確性和可靠性強,有國標支持。檢測成本高,儀器維護成本高。一般作為檢測機構終端判定方法,也有大型企業作為產品質量衛生指標控制方法。
4、膠體金定量分析卡法:是深圳市芬析儀器制造有限公司推出的光譜掃描吸峰方法,靈敏度高、結果可靠,可以和親和柱方法相媲美,檢測價格適中;有行業標準支持。適合中大型企業作為產品質量衛生指標控制。
5、液相或氣相串聯質譜法:一般作為高端實驗室實驗檢驗方法,主要作為研究或者國家部門對毒素情況監測、風險評估。